Schnelle fluoreszenz-spektroskopische Methode

Eine Methode zur Erfassung der Menge an bioaktiven lipophilen phenolischen Verbindungen (Tocopherole oder Vitamin E)
 

Frische Olivenöle enthalten eine variable Menge an Tocopherolen, lipophile phenolische Moleküle, die sich durch antioxidative und Vitamin-Aktivitäten auszeichnen (insbesondere Alpha-Tocopherol kann die Rolle des Vitamin E spielen).
 

Da diese Verbindungen jedoch oxidationsempfindlich sind, sinkt ihr Gehalt während der Lagerung des Öls (abhängig von den Bedingungen und von der natürlichen Zusammensetzung der Probe des Olivenöls).
 

Die Fluoreszenzanalyse von Olivenölen nutzt das Vorhandensein natürlicher fluoreszierender Verbindungen (z.B. Chlorophylle und Derivate) einschließlich der Tocopherole.
 

Die Fluoreszenzspektroskopie der Olivenölproben wurde mit einem 96-Wells Black Plate Reader durchgeführt. 
 

Für die Messungen (Anregung bei 302 nm und Emission bei 328 nm) wurde direkt eine kleine Menge der Olivenölprobe (250 µl) ohne zusätzliche Behandlungen (wie Verdünnung und Extraktion, siehe Abbildung 1) übertragen.
 

Die Ergebnisse der Fluoreszenzanalysen der Olivenölproben, die mit dieser Methode durchgeführt wurden, haben einen hohen Zusammenhang mit der HPLC-Quantifizierung des Gehalts an Alpha-Tocopherol (siehe Abbildung 2) aufgezeigt. Diese Methode wurde erfolgreich intern bewertet (z.B. in Bezug auf Parameter wie Präzision, Genauigkeit, LOD, LOQ, Robustheit).
 

Dieser Ansatz ermöglicht ein schnelles Hochdurchsatz-Screening der Gesamtmenge an Tocopherolen in Olivenölproben mit fast keiner Vorbereitung der Proben.

Abbildung 1: Analyseflussdiagramm - 250 µl natives Olivenöl wird in 96-Well-Platten übertragen und einer fluoreszenzspektroskopischen Analyse unterzogen.
 

Abbildung 2: Zusammenhang zwischen Alpha-Tocopherol-Konzentrationen, ermittelt unter Verwendung der fluoreszenzspektroskopischen Analyse und der HPLC-FLD-Referenzmethode.