Méthode M3
Détermination des esters éthyliques d'acides gras dans les huiles d'olive vierges par SPE-GC-FID
La méthode M3 a été développée dans le cadre du WP4 « Solutions analytiques pour résoudre les problèmes d'authenticité de l'huile d'olive », en particulier dans le cadre de la Tâche 4.2 « Détection du traitement illégal (désodorisation) : outils analytiques et marqueurs ». La procédure permet l'isolement de la fraction contenant les esters éthyliques d'acides gras (EEAG) présents dans les échantillons d'huile d'olive vierge (HOV). Dans cette méthode, une cartouche de silice de 1 g est proposée pour l'isolement de l'analyte comme alternative rapide à la phase préparatoire définie par l'annexe XX du règlement CEE 2568/91 pour la détermination des EEAG, qui nécessite un volume important de solvants ainsi qu'une procédure préparatoire très longue et complexe. La fraction isolée est ensuite analysée par GC-FID en utilisant une colonne de faible polarité et une injection sans chauffage sur la colonne.
Notre intérêt pour cette détermination réside dans le fait que l'évaluation analytique du contenu d'EEAG est l'un des paramètres de qualité qui permet de définir la catégorie de qualité d'une HOV et de détecter les mélanges frauduleux d'huiles d'olive vierge extra avec des huiles de moindre qualité, qu'il s'agisse d'huiles vierges, lampantes ou, indirectement, d'une sorte d'huiles désodorisées.
Le schéma de la méthode M3 est présenté dans la Fig. 1. La méthode a été validée en interne en termes de fidélité intra- et inter-journalière, de récupération, de linéarité, de robustesse, de limite de détection (LOD), de Limite de quantification (LOQ) et de justesse.
Fig.1 Schéma de l'isolement de la fraction EEAG par SPE
La détermination de la concordance entre les résultats obtenus en appliquant la méthode proposée et ceux obtenus avec la procédure de référence (annexe XX du règlement CEE 2568/91 pour la détermination des EEAG) a démontré l'équivalence des méthodes.
Conformément aux procédures du projet OLEUM, la méthode M3 a été sélectionnée pour une validation complète, comprenant la participation de dix laboratoires à une étude préliminaire où les participants ont reçu deux échantillons différents d'huile d'olive vierge extra et ont été invités à les analyser en suivant le mode opératoire standardisé (SOP) préparé par les développeurs de la méthode. Les participants ont également eu l'occasion d'assister à un atelier de partage des connaissances à Séville (octobre 2019), au cours duquel ils ont posé des questions et donné leur avis sur l'application du SOP analytique.
Les points faibles soulevés lors de l'étude préliminaire ont été abordés dans la version révisée du mode opératoire standardisé envoyé aux dix-sept participants à l'essai, dont les résultats sont en cours de collecte.
Instituto de la Grasa -CSIC- Équipe de développement de la M3 Raquel B. Gómez-Coca, Mª del Carmen Pérez-Camino et Wenceslao Moreda