Ταχεία μέθοδος φασματοσκοπίας φθορισμού
Μια μέθοδος για τον ποσοτικό προσδιορισμό βιοενεργών λιπόφιλων φαινολικών ενώσεων (τοκοφερόλες ή βιταμίνη Ε)
Ο ελαιόκαρπος περιέχει μία ποσότητα τοκοφερολών (~90% α-τοκοφερόλη), δηλαδή λιπόφιλων φαινολικών ενώσεων, οι οποίες έχουν αντιοξειδωτική και βιταμινική δράση.
Ωστόσο, καθώς οι ενώσεις είναι ευοξείδωτες, η περιεκτικότητα μειώνεται κατά την αποθήκευση του παρθένου ελαιολάδου (ανάλογα με τις επικρατούσες συνθήκες και την φυσική σύνθεση του ελαίου).
H φθορισμομετρική εξέταση του παρθένου ελαιολάδου ώς έχει, εκμεταλλεύεται την παρουσία φυσικών φθοριζουσών συστατικών (δηλαδή της χλωροφύλλης και των παραγώγων της) συμπεριλαμβανομένων των τοκοφερολών.
Η φθορισμομετρική εξέταση των δειγμάτων παρθένου ελαιολάδου πραγματοποιήθηκε μέσω ενός συστήματος με δυνατότητα ανάγνωσης σε μαύρο πλακίδιο με 96 πηγαδάκια. Oι μετρήσεις (λδιέγερσης 302nm, λεκπομπής 328nm) πραγματοποιήθηκαν μέσω απευθείας μεταφοράς μίας μικρής ποσότητας δείγματος paru;enoy ελαιολάδου (250 µl) που δεν έχει υποστεί πρόσθετη κατεργασία (όπως διάλυση και εκχύλιση, βλ. Σχήμα 1).
Τα αποτελέσματα των αναλύσεων φθορισμού των δειγμάτων παρθένου ελαιολάδου με τη χρήση αυτού του συστήματος, βρέθηκε πως έχουν υψηλή συσχέτιση με τον ποσοτικό προσδιορισμό με HPLC της περιεκτικότητας σε α-τοκοφερόλη (βλ. Σχήμα 2). Η μέθοδος αυτή επικυρώθηκε επιτυχώς ενδοεργαστηριακά (δηλαδή όσον αφορά τις παραμέτρους της πιστότητας, ακρίβειας, LOD, LOQ και ανθεκτικότητας).
Η προσέγγιση αυτή μπορεί να επιτρέψει τον γρήγορο έλεγχο μεγάλου πλήθους δειγμάτων ώς προς το ολικό περιεχόμενο σε τοκοφερόλες με μηδενική προετοιμασία των δειγμάτων.
Σχήμα 1: διάγραμμα ανάλυσης ροής - 250 µl παρθένου ελαιόλαδου μεταφέρονται σε μαύρο πλακίδιο με 96 πηγαδάκια και ακολουθεί καταγραφή του φάσματος φθορισμού.
Σχήμα 2: Συσχέτιση μεταξύ των τιμών συγκέντρωσης α-τοκοφερόλης όπως εκτιμήθηκε φθορισμομετρικά και υγροχρωματογραφικώς HPLC-FLD (μέθοδος αναφοράς).